1.1用蒸馏水将制胶玻璃板和梳子冲洗干净，并用吹风机将水分吹干，用夹子封闭玻璃板边缘，在玻璃板支架上夹紧。
1.2根据欲分离蛋白质大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的凝胶；
1.3将配好的分离胶溶液迅速加入制胶板中（约6mL），距梳子下端1cm左右，并在**后加适量的饱和正丁醇；
1.4室温下60~90分钟后分离胶完全凝结，清除凝胶顶端残余的饱和正丁醇；
1.5配制浓缩胶溶液，并迅速加入制胶板中（约2mL），轻轻插入梳子，保证不气泡产生；
1.6室温下30-60分钟后浓缩胶完全凝结，小心拔出梳子，将凝胶板安放在
电泳槽内；
1.7向
电泳槽中倒入电泳缓冲液，其量以没过胶板顶端为宜，如样品孔内有气泡，应设法除去；
1.8用移液枪将处理好的样品（20mL）慢加入被浸没的凝胶加样孔内；
1.9接通电源，红色为正极，黑色为负极，一般浓缩胶电压为80V，以浓缩胶和分离胶分割线为界，分离胶电压为120V，电泳2~3h即可；
1.10根据指示剂观察泳动的位置，判断是否终止电泳；
1.11电泳完毕，关上电源，在凝胶成像仪上观察电泳带及其位置，并与蛋白质分子量标准Marker比较样品蛋白质大小。
