琼脂糖凝胶电泳涉及的步骤

1. 为了制备凝胶，将琼脂糖粉与电泳缓冲液混合至所需浓度，并在微波炉中加热使其熔化。

琼脂糖凝胶浓度

• 所用琼脂糖的百分比取决于要分离的片段的大小。
• 琼脂糖的浓度是指琼脂糖相对于缓冲液体积的百分比（w / v），琼脂糖凝胶通常在0.2％至3％的范围内。
• 琼脂糖浓度越低，DNA片段迁移越快。
• 通常，如果目的是分离大的DNA片段，则应使用低浓度的琼脂糖，如果目的是分离小的DNA片段，则建议使用高浓度的琼脂糖。

2. 将溴化乙锭添加到凝胶中（最终浓度为0.5 ug / ml），以促进电泳后DNA的可视化。
3. 将溶液冷却至约60°C后，将其倒入装有样品梳子的浇铸盘中，使其在室温下固化。
4. 凝胶固化后，将梳子移开，注意不要撕裂孔的底部。
5. 仍在塑料托盘中的凝胶水平插入电泳仪并用缓冲液覆盖。
6. 然后将含有DNA与上样缓冲液混合的样品吸移到样品孔中，将盖子和电源线放在设备上，并施加电流。
7. 可以通过观察电极上的气泡确认电流。
8. 鉴于其负电荷，DNA将迁移至通常为红色的正电极。
9. DNA迁移到凝胶中的距离可以通过肉眼监测跟踪染料（如溴酚蓝和二甲苯氰染料）的迁移来判断。